1981年，塞缪尔·杰克逊出演了《丛林热》中那位嗑药成瘾的流浪汉，凭此他得到了生平的第一个奖项——戛纳最佳男配角奖，同时他也是戛纳的第一位黑人最佳男配角。

1994年《低俗小说》中的爆炸头杀手一角，成为塞缪尔·杰克逊最经典的银幕角色之一。这部作品也是他和导演昆汀合作的开始。

1995年，塞缪尔·杰克逊与大卫·卡罗素、尼古拉斯·凯奇合演了电影《致命布局》（又名：死亡之吻）。虽然本片邀请到不少重量级演员，但最终却因为缺少传统动作影片的元素，观众评价不高。

在1995年上映的《虎胆龙威3》中，塞缪尔·杰克逊与布鲁斯·威利斯合作出演了对手戏。在片中他饰演的是杂货店老板宙斯。这部电影十分卖座，最终在全球狂揽了3.66亿美元的票房。

1998年，他又与凯文·史派西在《王牌对王牌》中搭档。其实，影片剧本最初是为西尔维斯特·史泰龙和凯文·史派西而写，两人分别扮演塞比安和罗曼。当史泰龙拒绝出演本片时，史派西选择转而扮演塞比安，于是塞缪尔·杰克逊得到了罗曼的角色。

1999至2005年，塞缪尔·杰克逊接拍了乔治·卢卡斯的大制作《星战前传》系列，在片中出演绝地大师。前传三部曲从《星战正传》的30年前开始说起，讲述卢克天行者的父亲——阿纳金天行者的堕落史。

2000年的《杀戮战警》（又名：黑豹）成为塞缪尔·杰克逊第一部真正意义上主演的电影。他在片中的形象完全延续了1971年版《SHAFT》的风格，被定位为老SHAFT的侄子。同年，杰克逊在法国杜维尔电影节上被授予终生成就奖。

2009年，塞缪尔·杰克逊跟漫威影业连签了九部电影，并且在这些电影中扮演同一个角色——尼克·弗瑞。该角色是二战元老级特工、神盾局（S.H.I.E.L.D.）局长，也是美国政府和复仇者联盟联络的中间人。此后，影迷也亲切地称塞缪尔·杰克逊为“局长”。

2012年，昆汀的两大新旧爱将塞缪尔·杰克逊、克里斯托弗·瓦尔兹在电影《被解救的姜戈》中相逢。在片中，他饰演的是坎迪（莱昂纳多·迪卡普里奥饰）身边最忠诚的奴隶管家史蒂芬。

2017年，塞缪尔·杰克逊与瑞安·雷诺兹主演了喜剧电影《王牌保镖》。该片有不少枪战、飙车的暴力戏份，饰演杀手的塞缪尔·杰克逊全程开挂，嘴炮不断，而当时他已经有69岁了。